Slfn3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423018

Visão geral

Slfn3 (schlafen 3) codifica um membro da família Schlafen, implicada na regulação da diferenciação celular, da proliferação e de programas associados ao sistema imune em tecidos de camundongo. As proteínas Schlafen são comumente ligadas à sinalização responsiva a interferon, à modulação da tradução e do metabolismo de RNA, e ao controle dependente do contexto da progressão do ciclo celular. Em modelos epiteliais, Slfn3 tem sido estudada como um fator associado ao estado de diferenciação e à expressão de genes relacionados à barreira, conectando-a a vias que influenciam a homeostase tecidual e as respostas inflamatórias. Alterações na atividade da família schlafen têm sido investigadas em contextos de desregulação imune e biologia tumoral, tornando Slfn3 um alvo útil para estudos mecanísticos de controle do crescimento e de redes de sinalização imune.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Slfn3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Slfn3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Slfn3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Slfn3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Slfn3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Slfn3 para a investigação da sinalização de Slfn3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Slfn3 críticos para a função Slfn3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Slfn3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Slfn3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Slfn3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Slfn3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Slfn3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Slfn3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Slfn3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Slfn3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.