SLC6A15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-410592

概要

SLC6A15は、SLC6ファミリーに属するナトリウム依存性の中性アミノ酸トランスポーターをコードしており、分岐鎖アミノ酸をはじめとする中性アミノ酸の細胞内取り込みを担うことで、アミノ酸恒常性や神経伝達物質関連の代謝に寄与します。神経組織で高発現しており、アミノ酸の利用可能性や細胞ストレス応答に関連する経路を介して、栄養感知、シナプス機能、代謝カップリングなどのプロセスを支えます。SLC6A15の変異や発現変化は、研究において神経精神疾患様の表現型やストレス関連の生物学と関連付けられており、これは神経細胞の代謝的レジリエンスにおける同遺伝子の役割を反映しています。膜トランスポーターとしてのSLC6A15は、ヒト細胞モデルにおけるトランスポーター制御、トラフィッキング、ならびに基質依存的シグナル伝達を研究する上で、取り組みやすい標的（入口）にもなります。

SLC6A15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC6A15遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC6A15内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC6A15のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLC6A15タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLC6A15シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC6A15欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLC6A15の機能に不可欠なSLC6A15エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC6A15ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLC6A15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSLC6A15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC6A15遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLC6A15 HDRプラスミド（h）および SLC6A15 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC6A15ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC6A15標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。