SLC48A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426721

Visão geral

Slc48a1 codifica a SLC48A1 (também conhecida como gene 1 responsivo ao heme, HRG1), um transportador de membrana lisossomal que exporta heme do lúmen lisossomal para o citosol após a eritrofagocitose e a renovação endossomal/lisossomal de cargas que contêm heme. Ao mobilizar o heme lisossomal para catabolismo e reciclagem, a SLC48A1 contribui para a homeostase do ferro, a desintoxicação do heme e o processamento, mediado por macrófagos, do heme derivado de eritrócitos. Essa atividade se integra a vias que controlam a degradação do heme, as respostas ao estresse oxidativo e a reciclagem de ferro pelo sistema reticuloendotelial. A desregulação do transporte lisossomal de heme é relevante em contextos de pesquisa inflamatória e hematológica nos quais um desequilíbrio anormal de heme/ferro contribui para estresse tecidual e alteração da função imune inata.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLC48A1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Slc48a1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Slc48a1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Slc48a1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLC48A1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Slc48a1 para a investigação da sinalização de SLC48A1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Slc48a1 críticos para a função SLC48A1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Slc48a1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SLC48A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SLC48A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Slc48a1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SLC48A1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SLC48A1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Slc48a1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Slc48a1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.