Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SLC13A5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407118
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SLC13A5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SLC13A5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SLC13A5 Anticorpo (2G4): sc-293277
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SLC13A5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407118 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SLC13A5 codifica um transportador de citrato dependente de sódio (NaCT) que medeia a captação celular de citrato, ligando a disponibilidade extracelular de citrato ao fluxo de carbono intracelular. Ao influenciar os pools de citrato no citosol, SLC13A5 sustenta a geração de acetil-CoA para a lipogênese de novo e a acetilação de proteínas, e pode modular redes de sensoriamento energético que coordenam a glicólise, a anaplerose do ciclo do TCA (ciclo do ácido cítrico) e o equilíbrio redox. A atividade de SLC13A5 é mais estudada em tecidos metabolicamente ativos e em neurônios, onde o transporte de citrato se cruza com o metabolismo mitocondrial e a regulação epigenética por vias dependentes de acetilação. Alterações genéticas em SLC13A5 têm sido associadas a disfunção neurometabólica e a mudanças na homeostase de lipídios e glicose, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de fenótipos metabólicos e neuronais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLC13A5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC13A5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC13A5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC13A5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLC13A5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC13A5 para a investigação da sinalização de SLC13A5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC13A5 críticos para a função SLC13A5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC13A5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SLC13A5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SLC13A5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC13A5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SLC13A5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SLC13A5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC13A5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC13A5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.