Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SKIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407373
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SKIP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SKIP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SKIP Anticorpo (B-6): sc-365362
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SKIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407373 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
INPP5K codifica a inositol polifosfato-5-fosfatase K, comumente conhecida como SKIP, uma fosfatase de fosfoinositídeos que regula a sinalização celular de fosfoinositol ao desfosforilar PtdIns(4,5)P₂ e substratos relacionados. Ao ajustar a composição de fosfoinositídeos nas membranas, a SKIP influencia a organização do citoesqueleto de actina, o tráfego de membranas e a transdução de sinais a jusante de vias como PI3K/AKT, que dependem de mensageiros secundários lipídicos localizados. Alterações na atividade de INPP5K têm sido associadas a perturbações da homeostase muscular e do neurodesenvolvimento, tornando-a relevante para estudos de distúrbios congênitos que afetam a função neuromuscular e a arquitetura celular. Como os fosfoinositídeos coordenam múltiplos compartimentos e processos, a SKIP serve como um nó útil para dissecar o acoplamento membrana–citoesqueleto e a dinâmica de sinalização controlada por fosfatases em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SKIP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene INPP5K em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do INPP5K, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do INPP5K na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SKIP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de INPP5K para a investigação da sinalização de SKIP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) INPP5K críticos para a função SKIP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos INPP5K para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SKIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SKIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus INPP5K. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SKIP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SKIP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia INPP5K para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo INPP5K definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.