Six5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410513

Visão geral

SIX5 codifica o fator de transcrição homeobox humano Six5, um regulador de ligação ao DNA que ajuda a coordenar programas de expressão gênica durante o desenvolvimento e a diferenciação tecidual. O Six5 está associado ao controle de redes transcricionais que governam decisões de destino celular e pode interagir com vias ligadas à progressão do ciclo celular e à regulação de genes responsivos ao estresse. Alterações na dosagem de SIX5 ou na sua expressão desregulada têm sido implicadas em fenótipos relevantes para doenças, incluindo características associadas à distrofia miotônica tipo 1, por meio de efeitos em loci vizinhos e de paisagens regulatórias compartilhadas. Como o Six5 influencia a transcrição específica de linhagem e a homeostase celular, ele é frequentemente estudado em modelos de biologia do desenvolvimento, função neuromuscular e desregulação transcricional.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Six5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SIX5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SIX5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SIX5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Six5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SIX5 para a investigação da sinalização de Six5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SIX5 críticos para a função Six5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SIX5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Six5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Six5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SIX5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Six5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Six5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SIX5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SIX5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.