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SIRT1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400085-LAC | 200 µl | $455.00 |
SIRT1 编码长寿蛋白 1(sirtuin 1),是一种依赖 NAD⁺ 的蛋白去乙酰化酶,可协调细胞对营养状态、氧化应激和 DNA 损伤的应答。SIRT1 通过去乙酰化 p53、FOXO 转录因子、NF-κB 和 PGC-1α 等底物,调控染色质可及性、线粒体生物发生、自噬以及炎症信号等与代谢稳态相关的通路。SIRT1 的活性与 AMPK–mTOR 信号及昼夜节律调控相互交织,从而塑造影响细胞存活与分化的转录程序。SIRT1 表达或活性失调与衰老相关生物学过程,以及与癌症、神经退行性疾病和代谢紊乱相关的机制有关,因此常被用作通路层面研究的关键节点。
SIRT1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 SIRT1 表达。
SIRT1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在SIRT1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性SIRT1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 SIRT1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。