SIAE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423745
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SIAE O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SIAE, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SIAE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423745 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O SIAE (sialic acid acetylesterase) de camundongo codifica uma esterase lisossomal/secretada que remove grupos O-acetil dos ácidos siálicos, remodelando estruturas de glicanos em glicoproteínas e glicolipídios. Ao regular o estado de acetilação de ligantes sialilados, o SIAE influencia eventos de reconhecimento mediados por lectinas e a sinalização subsequente na superfície celular, com grande relevância para a homeostase de células imunes. Modificações alteradas dos ácidos siálicos estão associadas a mudanças nos limiares de sinalização do receptor de células B, em checkpoints de tolerância e em respostas inflamatórias, tornando o Siae um alvo útil em estudos de autoimunidade e desregulação imune. A edição de glicanos dependente de SIAE também se cruza com vias que governam o processamento endossomal/lisossomal e o tráfego de receptores, apoiando investigações em glicobiologia e imunometabolismo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SIAE (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Siae em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Siae, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Siae na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SIAE.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Siae para a investigação da sinalização de SIAE, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Siae críticos para a função SIAE
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Siae para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SIAE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SIAE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Siae. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SIAE Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SIAE (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Siae para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Siae definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.