SHISA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432346

Visão geral

Shisa2 codifica a SHISA2, uma proteína transmembrana de passagem única da família Shisa que pode modular o tráfego e a maturação de receptores na superfície celular, influenciando assim a disponibilidade desses receptores e a sinalização a jusante. Em células de camundongo, a SHISA2 tem sido associada à regulação de programas de desenvolvimento e diferenciação, com papéis descritos no controle da responsividade às vias WNT e FGF por meio de efeitos no processamento de receptores. Ao ajustar a intensidade da sinalização mediada por receptores, a SHISA2 pode afetar transições epitélio–mesênquima, a morfogênese tecidual e a estabilidade do estado celular. A expressão ou função desregulada de SHISA2 tem sido associada na literatura a alterações em redes de sinalização de fatores de crescimento relevantes para a biologia do câncer e outros distúrbios caracterizados por diferenciação aberrante e reprogramação da sinalização.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SHISA2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Shisa2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Shisa2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Shisa2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SHISA2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Shisa2 para a investigação da sinalização de SHISA2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Shisa2 críticos para a função SHISA2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Shisa2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SHISA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SHISA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Shisa2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SHISA2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SHISA2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Shisa2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Shisa2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.