Shank 3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-425500

개요

Shank3는 흥분성 시냅스의 시냅스후 밀도(postsynaptic density, PSD)에 농축되어 존재하는 다중 도메인 스캐폴드 단백질인 Shank 3를 암호화하며, 수용체와 신호전달 효소를 액틴 세포골격에 연결함으로써 글루탐산성 시냅스를 조직화합니다. Shank 3는 PSD-95/GKAP/Homer 복합체와의 상호작용을 통해 시냅스 성숙, 스파인 형태형성, 그리고 활동 의존적 가소성을 지지하며, mGluR 신호전달, CaMK/ERK 연쇄반응, 세포골격 재구성 등의 경로를 통합합니다. 마우스에서는 Shank3 기능이 신경발달 관련 표현형의 기반이 되는 시냅스 항상성과 회로 연결성의 기전을 연구하는 데 널리 활용됩니다. SHANK3 관련 네트워크의 교란은 자폐 스펙트럼 장애와 연관된 생물학 및 펠란–맥더미드 증후군과 연결되어 있어, 실험계에서 시냅스병증(synaptopathy)을 모델링하기 위한 핵심 표적으로 여겨집니다.

Shank 3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Shank3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Shank3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Shank3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Shank 3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Shank 3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Shank3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Shank 3 기능에 중요한 Shank3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Shank3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Shank 3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Shank 3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Shank3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Shank 3 HDR 플라스미드 (m) 및 Shank 3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Shank3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Shank3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.