SH-PTP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400369-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SH-PTP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SH-PTP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SH-PTP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PTPN6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SH-PTP1 Anticorpo (D-11): sc-7289
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SH-PTP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400369-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SH-PTP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400369-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTPN6 codifica a proteína citosólica tirosina fosfatase SH-PTP1 (SHP-1), um importante regulador negativo da sinalização a jusante de receptores imunes e de receptores de citocinas. Ao desfosforilar quinases ativadas e complexos de receptores, a SHP-1 atenua as saídas das vias JAK/STAT, MAPK/ERK e PI3K/AKT e ajuda a manter limiares de ativação, diferenciação e respostas inflamatórias. Em sistemas humanos, alterações na atividade de PTPN6 têm sido associadas à desregulação da sinalização imune, inflamação crônica e contextos de imunoncologia, tornando-o um nó útil para estudar o controle por feedback em modelos de células hematopoéticas e imunes. A perturbação funcional da SHP-1 também contribui para pesquisas sobre o equilíbrio entre fosfatases e quinases em redes de sinalização e sobre a dinâmica de sinalização proximal ao receptor.
SH-PTP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PTPN6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PTPN6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PTPN6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PTPN6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.