serum reponse factor /SRF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400470-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- serum reponse factor /SRFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase serum reponse factor /SRF (h) e o Plasmídeo Double Nickase serum reponse factor /SRF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SRF. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:serum reponse factor /SRF Anticorpo (A-11): sc-25290
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
serum reponse factor /SRF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400470-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
serum reponse factor /SRF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400470-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O SRF humano (serum response factor) é um fator de transcrição do tipo MADS-box que se liga a elementos de resposta ao soro para regular a expressão de genes de resposta imediata e programas do citoesqueleto de actina. Ele atua a jusante da sinalização MAPK/ERK e da dinâmica RhoA–actina por meio de cofatores como ELK1 e fatores de transcrição relacionados à miocardina, coordenando proliferação, migração e diferenciação. A transcrição dependente de SRF ajuda a manter a homeostase do citoesqueleto e as transições de estado celular, ligando-o a processos como miogênese, neurodesenvolvimento e remodelamento vascular. A atividade desregulada de SRF tem sido associada à invasividade de células tumorais e a redes transcricionais alteradas responsivas ao estresse, relevantes para a biologia do câncer e para mecanismos de doenças cardiovasculares.
serum reponse factor /SRF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SRF em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SRF. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SRF. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SRF interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.