SerpinB6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417434

Visão geral

SERPINB6 codifica a SerpinB6, um inibidor intracelular de proteases de serina da clade B que contribui para a citoproteção ao neutralizar atividade proteolítica aberrante e limitar o dano celular impulsionado pela proteólise. Ao restringir as proteases de serina no citosol e no núcleo, a SerpinB6 sustenta a proteostase e processos de resposta ao estresse que influenciam a sobrevivência celular, a diferenciação e a sinalização inflamatória. A expressão de SERPINB6 é particularmente relevante em contextos epiteliais e imunes, nos quais o equilíbrio entre proteases e antiproteases molda a função de barreira e a homeostase tecidual. A atividade desregulada de serpinas tem sido associada a alterações na suscetibilidade ao estresse proteotóxico e a patologias inflamatórias, tornando SERPINB6 um alvo útil para estudos mecanísticos do controle intracelular de proteases.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SerpinB6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SERPINB6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SERPINB6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SERPINB6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SerpinB6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SERPINB6 para a investigação da sinalização de SerpinB6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SERPINB6 críticos para a função SerpinB6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SERPINB6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SerpinB6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SerpinB6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SERPINB6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SerpinB6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SerpinB6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SERPINB6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SERPINB6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.