Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SERCA3 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402840-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- SERCA3 Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- SERCA3 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 SERCA3 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 ATP2A3을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 SERCA3 Antibody (PL/IM430): sc-81759
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
SERCA3 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-402840-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SERCA3 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-402840-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP2A3는 사람의 근형질/소포체 Ca2+-ATPase인 SERCA3를 암호화한다. SERCA3는 세포질의 Ca2+를 ER 내강으로 펌핑해 신호전달 사건 이후 기저 칼슘 농도를 회복시키는 P형 ATPase이다. SERCA3는 ER의 Ca2+ 저장고와 세포질 Ca2+ 일시적 변화(transient)를 조절함으로써 저장고 작동성 칼슘 유입(store-operated calcium entry), ER 내 단백질 접힘 및 품질 관리, 그리고 특수화된 세포 유형에서의 자극-분비 결합(stimulus-secretion coupling) 등 칼슘 의존적 경로의 양상을 형성하는 데 기여한다. ATP2A3/SERCA3의 발현 또는 활성 변화는 칼슘 항상성 조절 이상, ER 스트레스 반응, 분화 프로그램의 변화와 연관되어 보고되어 왔으며, 면역세포 신호전달과 상피 생물학 연구와도 관련성이 있다. 이러한 기능들로 인해 ATP2A3는 임상적 결과를 시사하지 않으면서도 증식, 세포사멸, 염증성 신호전달에 영향을 미치는 칼슘 처리 기전을 규명하는 데 유용한 표적이 된다.
SERCA3 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ATP2A3 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ATP2A3 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ATP2A3의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ATP2A3 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.