Septin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405151-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Septin 1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Septin 1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Septin 1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SEPT1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Septin 1 Anticorpo (H-10): sc-373925
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Septin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405151-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Septin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405151-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **SEPT1** codifica a septina 1, uma proteína citosquelética ligante de GTP que se monta em filamentos de septinas hetero-oligoméricos e em arcabouços semelhantes a anéis. A septina 1 contribui para a citocinese, a polaridade celular, o tráfego de vesículas e a organização das redes de actina e microtúbulos, sustentando o controlo espacial da dinâmica de membranas e da compartimentalização. A remodelação do citoesqueleto associada a **SEPT1** é relevante para processos como a migração celular e a progressão mitótica, e alterações na expressão ou montagem de septinas têm sido descritas em contextos que incluem transformação oncogénica e fenótipos do neurodesenvolvimento ou neurodegenerativos. Como parte da via mais ampla das septinas, **SEPT1** atua em coordenação com outras septinas para regular a formação do corpo médio (midbody) e as respostas ao stresse celular.
Septin 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SEPT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SEPT1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SEPT1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SEPT1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.