SEMA5A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422885
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEMA5A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SEMA5A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEMA5A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422885 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sema5a codifica a pista de orientação transmembranar SEMA5A, um membro da família das semaforinas que regula o direcionamento axonal, a migração neuronal e a formação de sinapses por meio de sinalização mediada por receptores que remodela o citoesqueleto. Além de suas funções no sistema nervoso, a SEMA5A contribui para programas de adesão e motilidade celular em múltiplos tecidos, cruzando-se com vias que moldam o movimento direcional e o padrão dos tecidos. A expressão ou sinalização alterada de SEMA5A tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e vem sendo estudada em contextos que envolvem conectividade aberrante e microambientes inflamatórios. Em modelos murinos, a perturbação de Sema5a é utilizada para dissecar mecanismos de montagem de circuitos e para relacionar a sinalização de orientação com mudanças de estado celular durante o desenvolvimento e processos relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SEMA5A (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sema5a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sema5a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sema5a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SEMA5A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sema5a para a investigação da sinalização de SEMA5A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sema5a críticos para a função SEMA5A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sema5a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SEMA5A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SEMA5A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sema5a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SEMA5A Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SEMA5A (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sema5a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sema5a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.