SEMA4F Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422884
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEMA4F O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SEMA4F, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEMA4F Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422884 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sema4f codifica a semaforina murina SEMA4F, uma molécula transmembranar de orientação que ajuda a coordenar a comunicação célula–célula e a organização espacial dos tecidos. A SEMA4F ativa a sinalização por plexina/neuropilina para modular a dinâmica do citoesqueleto, o crescimento de neuritos, a orientação de axônios e o remodelamento associado às sinapses, por meio de vias que convergem em GTPases da família Rho e na regulação da actina a jusante. Além do desenvolvimento e da plasticidade do sistema nervoso, a sinalização por semaforinas contribui para o posicionamento de células imunes e para o comportamento migratório em diversos microambientes. Redes semaforina–plexina desreguladas têm sido implicadas em fenótipos do neurodesenvolvimento e neuroinflamatórios, tornando o Sema4f um alvo útil para dissecar programas de orientação e motilidade em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SEMA4F (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sema4f em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sema4f, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sema4f na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SEMA4F.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sema4f para a investigação da sinalização de SEMA4F, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sema4f críticos para a função SEMA4F
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sema4f para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SEMA4F Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SEMA4F Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sema4f. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SEMA4F Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SEMA4F (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sema4f para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sema4f definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.