SEMA3G Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406077

Visão geral

SEMA3G codifica a semaforina-3G, uma molécula guia secretada que sinaliza por meio de complexos de receptores neuropilina/plexina para regular a remodelação do citoesqueleto, a migração celular e o padrão de organização dos tecidos. Além de seus papéis na orientação axonal e no neurodesenvolvimento, a SEMA3G influencia o brotamento angiogênico e linfático e pode modular o comportamento de células endoteliais e imunes por meio de sinalização dependente de semaforinas. Esses processos se cruzam com vias que controlam adesão, motilidade e remodelamento vascular, tornando a SEMA3G um ponto relevante para estudar biologia do desenvolvimento e a regulação do movimento celular dirigida pelo microambiente. Alterações na sinalização por semaforinas têm sido associadas à progressão do câncer e a fenótipos relacionados à metástase, bem como a disfunções vasculares e inflamatórias, o que apoia a investigação de SEMA3G em modelos relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SEMA3G (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SEMA3G em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SEMA3G, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SEMA3G na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SEMA3G.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SEMA3G para a investigação da sinalização de SEMA3G, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SEMA3G críticos para a função SEMA3G
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SEMA3G para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SEMA3G Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SEMA3G Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SEMA3G. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SEMA3G Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SEMA3G (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SEMA3G para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SEMA3G definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.