Selenoprotein W Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405939

Visão geral

SELENOW codifica a Selenoproteína W, uma pequena proteína que contém selénio, enriquecida em músculo e cérebro, que contribui para a homeostase redox celular através de atividade antioxidante dependente de selenol. Está implicada na regulação do equilíbrio de espécies reativas de oxigénio, na manutenção do estado dos tióis proteicos e no suporte à integridade do citoesqueleto e à adaptação ao stress em condições oxidativas e inflamatórias. Os processos associados a SELENOW intersectam-se com redes redox dependentes de glutationa e com aspetos mais amplos da biologia do selénio que influenciam a função mitocondrial e programas celulares de sobrevivência. Foi relatada expressão alterada de SELENOW em contextos de stress oxidativo, vias associadas à neurodegeneração e estados metabólicos e inflamatórios, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de sinalização redox e suscetibilidade ao stress.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Selenoprotein W (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SELENOW em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SELENOW, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SELENOW na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Selenoprotein W.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SELENOW para a investigação da sinalização de Selenoprotein W, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SELENOW críticos para a função Selenoprotein W
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SELENOW para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Selenoprotein W Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Selenoprotein W Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SELENOW. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Selenoprotein W Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Selenoprotein W (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SELENOW para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SELENOW definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.