SDHD Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-403276-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SDHD O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SDHD, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SDHD Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-403276-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A subunidade D do complexo succinato desidrogenase (SDHD) é um componente essencial de ancoragem à membrana do complexo II mitocondrial, acoplando a oxidação do succinato no ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) à transferência de elétrons para o pool de ubiquinona da via de fosforilação oxidativa (OXPHOS). Ao sustentar a conversão de succinato em fumarato e o fluxo da cadeia respiratória, a SDHD ajuda a manter o equilíbrio redox mitocondrial, a produção de ATP e a homeostase de espécies reativas de oxigênio. A perturbação da função de SDHD altera a sinalização metabólica, incluindo a regulação, dependente de succinato, de vias responsivas à hipóxia e respostas mais amplas ao estresse mitocondrial. A desregulação de SDHD está implicada em síndromes de predisposição a tumores, hereditárias e esporádicas, que afetam linhagens neuroendócrinas e paraganglionares, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos do metabolismo mitocondrial e de sinalização relevante para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SDHD (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SDHD em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SDHD, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SDHD na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SDHD.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SDHD para a investigação da sinalização de SDHD, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SDHD críticos para a função SDHD
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SDHD para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SDHD Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SDHD Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SDHD. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SDHD Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SDHD (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SDHD para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SDHD definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.