SCP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422828

概要

マウスScp2はステロールキャリアタンパク質2（SCP2）をコードしており、コレステロール、胆汁酸中間体、長鎖脂肪アシルCoAに結合して細胞内で輸送する小型の脂質移送タンパク質です。SCP2はペルオキシソームおよび細胞質における脂質の取り扱いで重要な役割を担っています。SCP2は細胞内脂質トラフィッキングを支えるとともに、ペルオキシソームのβ酸化、エーテル脂質代謝、ステロール恒常性に寄与し、膜組成や酸化ストレス応答に影響するより広範な脂質代謝ネットワークとも交差します。SCP2機能の変化は、コレステロールおよび脂肪酸利用の破綻と関連することが報告されており、代謝調節異常や脂質駆動性の細胞ストレス表現型の文脈でしばしば研究されています。そのためScp2は、ペルオキシソーム生物学、脂質輸送、ならびに疾患関連の細胞種における代謝経路の再編成に関する機構研究において重要です。

SCP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるScp2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Scp2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Scp2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SCP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SCP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Scp2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SCP2の機能に不可欠なScp2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Scp2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SCP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSCP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Scp2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SCP2 HDRプラスミド（m）および SCP2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはScp2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のScp2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。