SCP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423231

Visão geral

Sycp1 codifica a proteína 1 do complexo sinaptonêmico (SCP-1), um componente estrutural específico da meiose do complexo sinaptonêmico que se monta ao longo de cromossomos homólogos durante a prófase I. A SCP-1 sustenta a sinapse cromossômica, promove a formação de crossovers e ajuda a coordenar eventos de recombinação e reparo de DNA necessários para a segregação fiel em espermatócitos e oócitos. A disrupção da sinapse dependente de SYCP1 está associada à parada meiótica e à formação de gametas aneuploides, tornando-a relevante para estudos de infertilidade e desenvolvimento de células germinativas. Em camundongo, Sycp1 é amplamente utilizado como marcador e como nó mecanístico para dissecar a progressão meiótica, a sinalização de checkpoints e a integridade das vias de recombinação.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SCP-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sycp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sycp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sycp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SCP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sycp1 para a investigação da sinalização de SCP-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sycp1 críticos para a função SCP-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sycp1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SCP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SCP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sycp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SCP-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SCP-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sycp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sycp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.