Scleraxis Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422833
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Scleraxis O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Scleraxis, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Scleraxis Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422833 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Scx codifica o scleraxis, um fator de transcrição do tipo hélice–alça–hélice básica (bHLH) que atua como um regulador determinante de linhagem no desenvolvimento de tendões e ligamentos. O scleraxis coordena programas gênicos da matriz extracelular e a diferenciação tenogênica, integrando sinais da mecanotransdução e de vias de fatores de crescimento, como TGF-β, e redes de sinalização relacionadas que moldam a identidade de fibroblastos e a remodelação da matriz. Em modelos murinos, a atividade de Scx está intimamente ligada à homeostase do tecido conjuntivo, influenciando a organização do colágeno, a migração celular e a maturação tecidual durante o desenvolvimento e o reparo. A desregulação de programas transcricionais associados a Scx é relevante para estudos de tendinopatia, remodelação da matriz semelhante à fibrose e respostas a lesões musculoesqueléticas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Scleraxis (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Scx em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Scx, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Scx na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Scleraxis.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Scx para a investigação da sinalização de Scleraxis, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Scx críticos para a função Scleraxis
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Scx para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Scleraxis Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Scleraxis Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Scx. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Scleraxis Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Scleraxis (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Scx para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Scx definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.