SCARA5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407005

Visão geral

SCARA5 (receptor “scavenger” da classe A, membro 5) é um receptor de reconhecimento de padrões localizado na superfície celular, implicado na ligação e internalização de ligantes específicos, incluindo a ferritina, relacionando-o ao metabolismo do ferro e à endocitose mediada por receptor. Em células humanas, o SCARA5 contribui para a regulação da adesão e migração celulares e pode influenciar as respostas de sinalização inflamatória por meio de processos associados a receptores scavenger. Alterações na expressão de SCARA5 foram relatadas em múltiplos contextos tumorais e em microambientes fibróticos ou inflamatórios, nos quais podem correlacionar-se com mudanças em programas epitelial–mesenquimal e na remodelação da matriz extracelular. Essas características tornam o SCARA5 um alvo útil para estudos mecanísticos de sinalização associada ao ferro, tráfego de membrana e regulação, pelo microambiente, do comportamento celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SCARA5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SCARA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SCARA5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SCARA5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SCARA5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SCARA5 para a investigação da sinalização de SCARA5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SCARA5 críticos para a função SCARA5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SCARA5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SCARA5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SCARA5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SCARA5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SCARA5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SCARA5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SCARA5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SCARA5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.