SAPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406315
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SAPS1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SAPS1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SAPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406315 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PPP6R1 codifica a SAPS1, uma subunidade reguladora da fosfatase proteica 6 (PP6) que ajuda a direcionar a atividade catalítica para substratos específicos e para compartimentos subcelulares. Por meio da montagem do complexo PP6, a SAPS1 contribui para programas de desfosforilação de serina/treonina que influenciam a progressão do ciclo celular, a organização do fuso mitótico e a sinalização da resposta a danos no DNA. A fosforregulação ligada à PP6 cruza-se com vias ativadas por estresse e com o controle de checkpoints, moldando a estabilidade do genoma e a capacidade proliferativa. Subunidades reguladoras da PP6 desreguladas têm sido implicadas em alterações da homeostase de fosforilação observadas em múltiplos contextos de doença, incluindo a reprogramação de sinalização associada ao câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SAPS1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PPP6R1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PPP6R1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PPP6R1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SAPS1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PPP6R1 para a investigação da sinalização de SAPS1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PPP6R1 críticos para a função SAPS1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PPP6R1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SAPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SAPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PPP6R1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SAPS1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SAPS1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PPP6R1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PPP6R1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.