Sam 68 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401378-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sam 68O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Sam 68 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Sam 68 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KHDRBS1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sam 68 Anticorpo (H-4): sc-514468
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sam 68 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401378-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sam 68 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401378-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KHDRBS1 codifica a Sam68, uma proteína de ligação a RNA da família STAR que conecta a transdução de sinais ao metabolismo de RNA ao regular o splicing alternativo, a exportação de mRNA, a estabilidade e a tradução. Sam68 atua no núcleo e no citoplasma e é modulada por fosforilação a jusante de vias como as quinases da família Src e a MAPK, ligando a sinalização por fatores de crescimento à seleção de isoformas de transcritos. Por meio do controle de programas de processamento de RNA, KHDRBS1 influencia a progressão do ciclo celular, a apoptose e a dinâmica do citoesqueleto, sendo frequentemente implicado em proliferação e fenótipos invasivos em modelos relacionados ao câncer. A atividade desregulada de Sam68 também tem sido associada a alterações no processamento de RNA em neurônios e na expressão gênica responsiva ao estresse, reforçando sua relevância em estudos de splicing específico de tecido e de redes regulatórias de RNA.
Sam 68 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KHDRBS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KHDRBS1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KHDRBS1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KHDRBS1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.