SAK/STK18/PLK4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423195-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SAK/STK18/PLK4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SAK/STK18/PLK4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase SAK/STK18/PLK4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Plk4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SAK/STK18/PLK4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423195-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SAK/STK18/PLK4 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423195-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Plk4** de camundongo codifica uma quinase de serina/treonina também conhecida como **SAK/STK18/PLK4**, que atua como regulador mestre da biogênese de centríolos e da duplicação do centrossomo. A atividade de **PLK4** coordena o recrutamento e a fosforilação de fatores de montagem do centríolo, conectando o ciclo do centrossomo à progressão do ciclo celular e à organização do fuso mitótico. Níveis desregulados de **PLK4** podem levar à duplicação excessiva de centríolos, à presença de centrossomos supranumerários e à instabilidade cromossômica — processos frequentemente estudados em modelos de aneuploidia, tumorigenese e fenótipos do neurodesenvolvimento. Como um polo de sinalização no centrossomo, **PLK4** é comumente investigada em vias que regulam a fidelidade mitótica, o controle de checkpoints e a organização dependente de microtúbulos.
SAK/STK18/PLK4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Plk4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Plk4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Plk4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Plk4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.