S-100A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405822

概要

S100A3は、角化上皮や毛包の生物学に豊富に発現するカルシウム結合性のS100ファミリータンパク質S-100A3をコードしており、そこで細胞骨格の組織化や細胞分化プログラムに寄与します。S-100A3はCa²⁺依存的な立体構造変化を介してタンパク質間相互作用に関与し、上皮の構造リモデリングや酸化還元感受性のプロセスに影響を及ぼし得ます。S100A3を含むS100タンパク質の発現異常は、上皮組織における分化状態の変化、炎症シグナル、腫瘍関連表現型との関連が報告されています。そのためS100A3は、上皮の発生、ストレス応答、ならびに組織構築に関わる疾患関連の変化を扱う研究で、しばしば解析対象となっています。

S-100A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるS100A3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、S100A3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、S100A3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、S-100A3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、S-100A3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、S100A3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• S-100A3の機能に不可欠なS100A3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、S100A3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• S-100A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびS-100A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、S100A3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  S-100A3 HDRプラスミド（h）および S-100A3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはS100A3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のS100A3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。