RyR-2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402986

개요

RYR2는 근형질/소포체(사코/소포체)에 위치한 사량체(tetramer) 형태의 세포내 Ca²⁺ 방출 채널인 ryanodine receptor 2(RyR-2)를 암호화하며, 칼슘 유도 칼슘 방출(calcium-induced calcium release)을 생성함으로써 흥분–수축 연동(excitation–contraction coupling)을 매개합니다. RyR-2의 활성은 심근세포 수축, 미토콘드리아 대사, 그리고 CaMKII 및 칼시뉴린/ NFAT 연계 전사 반응을 포함한 Ca²⁺ 의존성 신호전달 경로를 조절하는 Ca²⁺ 일과성 변화(Ca²⁺ transients)를 조율합니다. 채널 기능은 거대분자 복합체 조립, 번역 후 수식(post-translational modification), 그리고 내강(luminal) Ca²⁺ 감지에 의해 형성되며, 아드레날린성 입력을 세포내 Ca²⁺ 항상성과 통합합니다. RYR2의 유전적 및 기능적 교란은 유전성 부정맥 증후군과 심근병증 관련 표현형과 연관되어 있어, 심장 칼슘 핸들링과 스트레스 반응성 신호전달을 연구하는 데 중심적인 노드로 여겨집니다.

RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RYR2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RYR2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RYR2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RYR2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout 기능에 중요한 RYR2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RYR2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RYR2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout HDR 플라스미드 (h) 및 RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RYR2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RYR2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.