Rubicon Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404222-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RubiconO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rubicon (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rubicon (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RUBCN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rubicon Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404222-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rubicon Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404222-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RUBCN codifica a Rubicon, uma proteína que contém um domínio RUN e atua como um importante regulador negativo da autofagia ao modular a atividade de VPS34/PI3KC3 e a maturação do autofagossomo. A Rubicon também participa do tráfego endolisossomal e se conecta à sinalização imune inata por meio da regulação da fagocitose associada a LC3 e de vias vesiculares relacionadas. Ao controlar o fluxo autofágico e a depuração dependente de lisossomos, a Rubicon influencia a homeostase celular em condições de estresse e molda respostas inflamatórias. A desregulação da atividade de RUBCN/Rubicon tem sido implicada em contextos nos quais a autofagia e o processamento de fagossomos estão alterados, incluindo neurodegeneração, biologia de infecções, disfunção metabólica e adaptação celular relacionada ao câncer, o que a torna um alvo útil para estudos mecanísticos.
Rubicon O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RUBCN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RUBCN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RUBCN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RUBCN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.