RRBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410995

Visão geral

RRBP1 (proteína de ligação ao ribossomo 1) codifica uma proteína associada à membrana do retículo endoplasmático (RE) que apoia o direcionamento cotraducional de polipeptídeos recém-sintetizados ao RE e contribui para a organização do RE e para a capacidade da via secretora. Ao ligar ribossomos ao RE rugoso, o RRBP1 influencia a síntese, o dobramento e o tráfego de proteínas, processos intimamente conectados à homeostase do RE e à resposta a proteínas mal dobradas (unfolded protein response, UPR). Alterações na expressão de RRBP1 foram relatadas em contextos de estresse celular e remodelamento proliferativo, tornando-o relevante para o estudo de proteostase, adaptação associada ao RE e redes de sinalização acopladas à demanda secretora. Assim, RRBP1 é de interesse em modelos que investigam sensibilidade ao estresse do RE, dinâmica do tráfego de membranas e perturbações do manuseio proteico associadas a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RRBP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RRBP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RRBP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RRBP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RRBP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RRBP1 para a investigação da sinalização de RRBP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RRBP1 críticos para a função RRBP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RRBP1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RRBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RRBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RRBP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RRBP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RRBP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RRBP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RRBP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.