Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RPA194 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400816-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RPA194O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RPA194 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RPA194 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para POLR1A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RPA194 Anticorpo (C-1): sc-48385
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RPA194 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400816-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RPA194 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400816-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
POLR1A codifica a RPA194, a subunidade catalítica da RNA polimerase I que conduz a síntese do pré-rRNA 47S no nucléolo, uma etapa limitante para a biogênese de ribossomos. A RPA194 atua no maquinário de transcrição da Pol I para sustentar a organização nucleolar, o crescimento celular e a coordenação do processamento do RNA ribossômico com o estado metabólico da célula. A perturbação da transcrição de rRNA dependente de POLR1A altera a sinalização de estresse nucleolar e as respostas subsequentes associadas ao p53, ligando essa via ao controle do ciclo celular e à vigilância do genoma. Variações genéticas e a desregulação da atividade da Pol I têm sido associadas a fenótipos relacionados a ribossomopatias e são amplamente estudadas no contexto da biologia proliferativa e da adaptação ao estresse.
RPA194 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus POLR1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de POLR1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função POLR1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com POLR1A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.