RNPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422692

Visão geral

O gene Rnps1 do camundongo codifica a RNPS1, uma proteína conservada de ligação a RNA que atua no splicing do pré-mRNA e na vigilância de mRNPs após o splicing. A RNPS1 participa de processos associados ao complexo de junção de éxons (exon junction complex, EJC) e dá suporte à degradação de mRNA mediada por nonsense (NMD), influenciando o controle de qualidade dos transcritos, a exportação de mRNA e a competência para tradução. Por meio dessas atividades, a RNPS1 ajuda a manter a integridade do proteoma e regula programas de expressão gênica ligados à progressão do ciclo celular e às respostas ao estresse. A desregulação das vias de splicing e de vigilância de mRNA está amplamente implicada em fenótipos do neurodesenvolvimento e na remodelação do transcriptoma associada ao câncer, tornando a RNPS1 um nó útil para estudos mecanísticos do processamento de RNA.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RNPS1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Rnps1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Rnps1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Rnps1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RNPS1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Rnps1 para a investigação da sinalização de RNPS1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Rnps1 críticos para a função RNPS1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Rnps1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RNPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo RNPS1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Rnps1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RNPS1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR RNPS1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Rnps1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Rnps1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.