RNF31 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412436-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF31O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF31 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RNF31 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF31. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF31 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412436-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RNF31 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412436-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF31 codifica uma ligase de ubiquitina E3 que atua como o núcleo catalítico do complexo de montagem de cadeias lineares de ubiquitina (LUBAC), gerando cadeias de ubiquitina ligadas em Met1 que modulam a transdução de sinais. Por meio da regulação da via de NF-κB e da sinalização imune inata, RNF31 ajuda a controlar a expressão de genes inflamatórios, a resistência à apoptose e as respostas celulares ao estresse. Sua atividade influencia o remodelamento, dependente de ubiquitina, de complexos de sinalização a jusante de receptores como o TNFR e receptores de reconhecimento de padrões. A desregulação da função de RNF31/LUBAC tem sido associada a alterações na homeostase imune e a contextos de sinalização oncogênica, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos do controle de vias dirigido por ubiquitinação.
RNF31 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF31 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF31. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF31. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF31 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.