RNase T2a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-437175
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNase T2a O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RNase T2a, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RNase T2 Anticorpo (E-5): sc-393729
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNase T2a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-437175 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Rnaset2a codifica a ribonuclease lisossomal/secretada RNase T2a, um membro da conservada família RNase T2 envolvida no turnover de RNA e na reciclagem de nucleotídeos. A RNase T2a contribui para a homeostase celular ao promover a degradação de RNA extracelular e endolisossomal, conectando o catabolismo de RNA à função lisossomal e a vias mais amplas de resposta ao estresse e de sinalização inflamatória. Em modelos murinos, a perturbação da atividade da família RNase T2 é usada para estudar como a persistência aberrante de RNA influencia o reconhecimento imune inato, a neuroinflamação e o remodelamento tecidual. Esses processos são relevantes para investigações mecanísticas de fenótipos semelhantes aos de doenças de depósito lisossomal e de inflamação estéril associada ao processamento desregulado de ácidos nucleicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RNase T2a (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Rnaset2a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Rnaset2a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Rnaset2a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RNase T2a.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Rnaset2a para a investigação da sinalização de RNase T2a, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Rnaset2a críticos para a função RNase T2a
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Rnaset2a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RNase T2a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo RNase T2a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Rnaset2a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RNase T2a Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR RNase T2a (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Rnaset2a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Rnaset2a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.