Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RLF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406295
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RLF O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RLF, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RLF Anticorpo (D-7): sc-365373
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RLF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406295 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RGL2 (estimulador do dissociador de nucleótidos de guanina tipo Ral 2) codifica um fator de troca de nucleótidos de guanina da família Ras que ajuda a ativar as pequenas GTPases RalA/RalB a jusante da sinalização de Ras. Ao modular o ciclo das GTPases Ral, o RGL2 influencia saídas de sinalização associadas a MAPK e PI3K que regulam a remodelação do citoesqueleto, o tráfego vesicular, a progressão do ciclo celular e as respostas ao stress. Alterações na atividade da sinalização Ras–Ral têm sido implicadas na transformação oncogénica e na invasão de células tumorais em múltiplos contextos tecidulares, tornando o RGL2 um nó útil para estudos mecanísticos da arquitetura das vias. Em modelos celulares humanos, a perturbação de RGL2 permite investigar como a seleção de efetores de Ras molda fenótipos proliferativos e migratórios e como isso se cruza com a sinalização de recetores tirosina-quinase.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RLF (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RGL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RGL2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RGL2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RLF.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RGL2 para a investigação da sinalização de RLF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RGL2 críticos para a função RLF
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RGL2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RLF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RLF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RGL2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RLF Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RLF (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RGL2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RGL2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.