RIM-BP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406740

Visão geral

RIMBP2 codifica a RIM-BP2, uma proteína de andaime da zona ativa pré-sináptica que acopla canais de Ca2+ dependentes de voltagem à maquinaria de liberação de neurotransmissores por meio de interações com proteínas RIM e outros componentes sinápticos. Ao organizar o influxo de Ca2+ em conjunto com o ancoramento e o “priming” de vesículas sinápticas, a RIM-BP2 favorece uma exocitose eficiente evocada por potenciais de ação e a plasticidade sináptica de curto prazo em sinapses excitatórias. Essa proteína participa da sinalização dependente de Ca2+ no terminal pré-sináptico e influencia a dinâmica do ciclo de vesículas, que molda a força sináptica. Alterações genéticas em RIMBP2 têm sido associadas a fenótipos neurodesenvolvimentais e neuropsiquiátricos, tornando-o relevante para o estudo de defeitos na transmissão sináptica e de disfunções em nível de circuitos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RIM-BP2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RIMBP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RIMBP2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RIMBP2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RIM-BP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RIMBP2 para a investigação da sinalização de RIM-BP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RIMBP2 críticos para a função RIM-BP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RIMBP2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RIM-BP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RIM-BP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RIMBP2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RIM-BP2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RIM-BP2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RIMBP2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RIMBP2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.