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Ribosomal Protein S3双切口酶质粒(h) | sc-402327-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ribosomal Protein S3双切口酶质粒(h2) | sc-402327-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RPS3 编码人类核糖体蛋白 S3,是 40S 核糖体小亚基的核心组成部分,对准确的翻译起始和 mRNA 解码至关重要。除在核糖体生物发生中的结构性作用外,RPS3 还与细胞应激反应以及调控信号通路有关,这些信号通路用于协调蛋白质合成与细胞生长及 DNA 损伤监测。核糖体蛋白稳态的改变会扰乱翻译调控与蛋白稳态(proteostasis),而这些过程常与肿瘤生物学及其他以细胞增殖失调为特征的疾病相关。因此,RPS3 常被用于研究核糖体功能、应对应激的转录程序,以及连接翻译过程与基因组完整性的机制。
Ribosomal Protein S3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RPS3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RPS3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RPS3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RPS3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。