Ribosomal Protein S18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406494

Visão geral

RPS18 codifica a proteína ribossômica S18, um componente essencial da subunidade ribossômica pequena 40S, que ajuda a estabilizar a estrutura do rRNA e sustenta a decodificação precisa durante a iniciação e o alongamento da tradução. Como parte da biogênese do ribossomo e da síntese global de proteínas, RPS18 contribui para a proteostase, o crescimento celular e vias de controle traducional adaptativas ao estresse. A expressão alterada ou a perturbação de proteínas ribossômicas pode influenciar a sinalização de estresse nucleolar e checkpoints dependentes de p53, ligando a disfunção ribossômica a mudanças em programas de proliferação e apoptose. A biogênese ribossômica e a tradução desreguladas são características recorrentes do câncer e das ribossomopatias, tornando RPS18 um nó útil para estudar como a maquinaria traducional central se conecta a estados celulares associados a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein S18 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RPS18 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RPS18, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RPS18 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ribosomal Protein S18.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RPS18 para a investigação da sinalização de Ribosomal Protein S18, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RPS18 críticos para a função Ribosomal Protein S18
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RPS18 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Ribosomal Protein S18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Ribosomal Protein S18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RPS18. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Ribosomal Protein S18 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Ribosomal Protein S18 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RPS18 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RPS18 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.