Ribosomal Protein L30 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406356

개요

RPL30은 리보솜 단백질 L30을 암호화하며, 이는 60S 대형 리보솜 소단위의 핵심 구성 요소로서 리보솜 조립과 번역 신장에 기여합니다. 리보솜 생합성과 단백질 합성 네트워크의 일부로서 RPL30은 효율적인 mRNA 번역을 가능하게 함으로써 단백질 항상성(proteostasis)과 성장 관련 신호전달을 뒷받침합니다. 리보솜 단백질의 교란은 핵소체 스트레스 반응을 유발하고 p53 의존적 체크포인트를 변화시킬 수 있어, 리보솜 기능이 세포주기 조절 및 세포사멸과 연결됨을 시사합니다. 리보솜 생합성과 번역 조절의 이상은 증식 상태 및 스트레스 적응 상태 전반에서 반복적으로 관찰되는 특징이므로, RPL30은 번역 능력과 세포 적합성(cellular fitness)을 연결하는 기전을 연구하는 데 관련성이 큽니다.

Ribosomal Protein L30 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RPL30 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RPL30 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RPL30의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Ribosomal Protein L30 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Ribosomal Protein L30 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RPL30 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Ribosomal Protein L30 기능에 중요한 RPL30 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RPL30 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Ribosomal Protein L30 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Ribosomal Protein L30 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RPL30 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Ribosomal Protein L30 HDR 플라스미드 (h) 및 Ribosomal Protein L30 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RPL30 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RPL30 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.