RhoB CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400875

개요

RHOB는 Rho 계열에 속하는 프레닐화된 소형 GTPase인 RhoB를 암호화하며, 액틴 세포골격의 역학, 엔도사이토시스 수송, 그리고 막 수용체의 턴오버를 조절합니다. RhoB는 GDP 결합 상태와 GTP 결합 상태 사이를 순환하면서 세포 부착, 이동, 소낭 수송, 스트레스 반응과 연결된 신호 조절 지점을 조율하고, Rho/ROCK 경로를 비롯해 MAPK 및 PI3K의 영향을 받는 보다 광범위한 과정들과 기능적으로 연계됩니다. 밀접하게 관련된 다른 Rho GTPase들과 달리 RhoB는 엔도좀 막에 풍부하게 존재하며, 세포 스트레스에 의해 자주 유도되어 신호의 구획화를 매개하는 핵심 인자로 자리합니다. RHOB의 발현 또는 활성 변화는 암 관련 표현형, 염증성 신호전달, 혈관 생물학과 연관되어 있어, 증식, 침윤, 수용체-유도 신호전달의 기전 연구에 중요합니다.

RhoB CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RHOB 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RHOB 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RHOB의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RhoB 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RhoB 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RHOB 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RhoB 기능에 중요한 RHOB 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RHOB 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RhoB CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 RhoB CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RHOB 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RhoB HDR 플라스미드 (h) 및 RhoB HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RHOB 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RHOB 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.