非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
RELA/NFκB p65CRISPR激活质粒(h): sc-400004-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- RELA/NFκB p65 CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- RELA/NFκB p65 CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 RELA/NFκB p65 CRISPR 激活质粒 (h) 和 RELA/NFκB p65 CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 RELA 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：RELA/NFκB p65: sc-8008，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
RELA/NFκB p65CRISPR激活质粒(h) | sc-400004-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
RELA/NFκB p65CRISPR激活质粒(h2) | sc-400004-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
RELA 编码 NF-κB 的 p65 亚基。NF-κB 是一种关键的转录因子，负责调控可诱导的基因表达程序，进而控制炎症反应、先天与适应性免疫信号传导、细胞存活以及应激反应等过程。通过 TNF 受体、IL-1 受体、Toll 样受体以及抗原受体等通路被激活后，p65 会形成二聚体（常与 NFKB1/p50 配对），转位进入细胞核，并调控细胞因子、趋化因子、黏附分子以及抗凋亡因子的表达。RELA 的活性受 IκB 介导的胞质滞留所限制，同时也会受到刺激依赖性的翻译后修饰调控，这些修饰可微调其与染色质的结合及转录输出。NF-κB/RELA 信号失调常与慢性炎症状态、致癌性转录程序，以及与肿瘤进展和免疫逃逸相关的肿瘤微环境相互作用密切相关。
RELA/NFκB p65 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性RELA的表达。
RELA/NFκB p65 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的RELA基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于RELA转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性RELA/NFκB p65表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的RELA位点，并能够研究内源性位点上依赖于RELA/NFκB p65的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在RELA表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟RELA/NFκB p65通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。