Reg IIIγ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418109
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Reg IIIγ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Reg IIIγ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Reg IIIγ Anticorpo (179A2Y): sc-517630
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Reg IIIγ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-418109 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
REG3G codifica a proteína regeneradora derivada das ilhotas 3 gama (Reg IIIγ), uma proteína antimicrobiana secretada do tipo lectina C, implicada na defesa da barreira epitelial e na regulação da imunidade inata em superfícies mucosas. A Reg IIIγ reconhece glicanos da parede celular bacteriana e contribui para o controlo da colonização microbiana, ligando a sua atividade às interações hospedeiro–microbioma e à sinalização inflamatória no trato gastrointestinal. A expressão é frequentemente induzível por vias acionadas por citocinas, incluindo a sinalização IL-22/STAT3, e pode ser modulada a jusante da ativação de recetores de reconhecimento de padrões e de respostas associadas ao NF-κB. A desregulação da expressão de REG3G tem sido associada a alterações da imunidade mucosa e a fenótipos relevantes para inflamação, sustentando a sua utilização como um nó funcional em estudos de disfunção de barreira e mecanismos de doença mediados pelo sistema imunitário.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Reg IIIγ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene REG3G em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do REG3G, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do REG3G na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Reg IIIγ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de REG3G para a investigação da sinalização de Reg IIIγ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) REG3G críticos para a função Reg IIIγ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos REG3G para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Reg IIIγ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Reg IIIγ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus REG3G. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Reg IIIγ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Reg IIIγ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia REG3G para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo REG3G definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.