RECK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402440
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RECK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RECK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RECK Anticorpo (G-4): sc-373929
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RECK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402440 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RECK (proteína rica em cisteína indutora de reversão, com motivos Kazal) é um regulador ancorado à membrana da remodelação da matriz extracelular (MEC) que suprime a atividade de múltiplas metaloproteinases da matriz, incluindo MMP2, MMP9 e MT1-MMP. Ao restringir a proteólise pericelular, RECK influencia a adesão célula–matriz, a migração e a invasão, e cruza-se com vias que governam a angiogênese e a morfogênese tecidual. A expressão de RECK é frequentemente reduzida em diversos contextos tumorais e está associada a alterações no comportamento invasivo e no potencial metastático, tornando-a um nó-chave em estudos de fenótipos de doença impulsionados pelo microambiente. Além disso, o controle da atividade de proteases dependente de RECK a vincula ao remodelamento inflamatório e a processos relacionados à fibrose, nos quais a renovação da MEC está desregulada.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RECK (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RECK em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RECK, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RECK na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RECK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RECK para a investigação da sinalização de RECK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RECK críticos para a função RECK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RECK para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RECK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RECK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RECK. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RECK Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RECK (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RECK para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RECK definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.