Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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RBP2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-431972-LAC
- alvos específicos: mouse
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- RBP2 as Partículas de Ativação Lentiviral (m) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- RBP2 As partículas de ativação lentivirais (m) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo RBP2 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m) e pelo RBP2 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor Kdm5a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: RBP2 Anticorpo (G-12): sc-365993
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RBP2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m) | sc-431972-LAC | 200 µl | $455.00 |
Kdm5a codifica a RBP2 (também conhecida como JARID1A), uma desmetilase de histonas dependente de Fe(II)/2-oxoglutarato que remove principalmente as marcas H3K4me3/2 para modular o início da transcrição e a acessibilidade da cromatina. Em células de camundongo, a RBP2 integra-se a redes regulatórias epigenéticas que controlam a progressão do ciclo celular, a especificação de linhagens e programas de diferenciação, e pode atuar em coordenação com complexos transcricionais associados à via do retinoblastoma (RB). Ao moldar os estados de promotores e enhancers, Kdm5a influencia processos como respostas a danos no DNA, adaptação ao estresse de replicação e manutenção da fidelidade transcricional. A desregulação da atividade de Kdm5a/RBP2 tem sido associada a trajetórias de desenvolvimento alteradas e a fenótipos relevantes para doenças em modelos de biologia do câncer, neurodesenvolvimento e função de células-tronco, por meio da perturbação do controle gênico baseado em cromatina.
As Partículas de Ativação Lentivirais RBP2 (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Kdm5a numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais RBP2 (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Kdm5a, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de RBP2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Kdm5a e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.