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RBP-Jκ双切口酶质粒(m) | sc-422626-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBP-Jκ双切口酶质粒(m2) | sc-422626-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rbpj 编码 RBP-Jκ,这是一种序列特异性的 DNA 结合转录因子,是经典 Notch 信号通路在细胞核内的核心效应分子。Notch 受体被激活后,RBP-Jκ 通过招募 NICD 及共激活因子,从转录抑制子转变为转录激活子,从而调控控制细胞命运决定、增殖与分化的基因。在小鼠体系中,依赖 RBP-Jκ 的调控程序在造血、神经发生和免疫细胞发育中至关重要;Notch–RBP-Jκ 转录输出的失调也常被用作研究致癌转化机制与发育表型的理论框架。作为整合 Notch 输入并连接染色质与转录调控的枢纽,Rbpj 被广泛用于研究干细胞/祖细胞维持及谱系承诺等相关通路。
RBP-Jκ 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Rbpj 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Rbpj内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Rbpj的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Rbpj基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。