RBMY1J Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405629

Visão geral

RBMY1J codifica uma proteína de ligação a RNA ligada ao cromossoma Y, relacionada com a família RBMY, caracterizada por um motivo de reconhecimento de RNA e por funções na regulação pós-transcricional. As proteínas RBMY são expressas predominantemente na linhagem germinal masculina e estão implicadas na espermatogénese através do controlo do splicing de pré‑mRNA, da estabilidade do mRNA e, potencialmente, da regulação da tradução em células germinais em desenvolvimento. Esta atividade cruza-se com vias de processamento de RNA associadas ao spliceossoma e com programas mais amplos de expressão génica necessários para a progressão meiótica e a diferenciação de células germinais. Alterações na integridade do locus RBMY ou na sua expressão têm sido associadas a anomalias do cromossoma Y e a fenótipos de infertilidade masculina, tornando o RBMY1J relevante para estudos de regulação génica na linhagem germinal e biologia reprodutiva.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RBMY1J (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RBMY1J em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RBMY1J, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RBMY1J na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RBMY1J.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RBMY1J para a investigação da sinalização de RBMY1J, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RBMY1J críticos para a função RBMY1J
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RBMY1J para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RBMY1J Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RBMY1J Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RBMY1J. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RBMY1J Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RBMY1J (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RBMY1J para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RBMY1J definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.