RBM47 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-434185-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RBM47O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RBM47 (m) e o Plasmídeo Double Nickase RBM47 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rbm47. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RBM47 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-434185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM47 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-434185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rbm47 codifica a proteína RBM47, que contém o motivo de ligação a RNA, um regulador conservado da expressão gênica pós-transcricional que se liga a transcritos específicos para influenciar a estabilidade, a localização e o splicing alternativo do mRNA. Em células de camundongo, a RBM47 contribui para programas de processamento de RNA que moldam a diferenciação epitelial e respostas transcricionais ao estresse, conectando-se a vias mais amplas do metabolismo de RNA que incluem fatores associados ao spliceossomo e à vigilância de RNA. Alterações na atividade de RBM47 têm sido associadas a redes de expressão gênica desreguladas relevantes para o desenvolvimento e para a plasticidade epitélio–mesênquima, tornando-a um ponto útil para estudar mecanismos que ligam a regulação de RNA a transições de estado celular. Essas características posicionam a RBM47 como um alvo relevante para dissecar como proteínas ligantes de RNA coordenam a remodelação do transcriptoma na fisiologia normal e em contextos relevantes para doenças.
RBM47 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rbm47 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rbm47. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rbm47. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rbm47 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.