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| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RBM15 Plasmídeo de ativação de CRISPR (h) | sc-417289-ACT | 20 µg | $397.00 |
RBM15 (proteína 15 com motivo de ligação a RNA) é um fator nuclear de ligação a RNA que regula a expressão gênica por meio do controle do processamento de pré-mRNA e do metabolismo de mRNA. Está implicado em programas de diferenciação hematopoética e participa de redes transcricionais e pós-transcricionais, incluindo interações com a maquinaria epitranscriptômica que influencia decisões sobre o destino do RNA. A atividade desregulada de RBM15 tem sido associada a fenótipos de comprometimento de linhagem e proliferação alterados, e rearranjos do gene RBM15 foram relatados em contextos de neoplasias hematológicas, sustentando sua relevância para o estudo de circuitos transcricionais oncogênicos e de vias regulatórias de RNA.
RBM15 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de RBM15 sem alterar a sequência de ADN subjacente.
RBM15 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus RBM15 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.
Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição RBM15, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de RBM15. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus RBM15 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de RBM15 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via RBM15 em células tumorais com expressão de RBM15 silenciada ou reduzida.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.