Plásmido Doble Nickase (h) RBM14: sc-417972-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RBM14 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RBM14 (h) y el plásmido de doble nickasa RBM14 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RBM14. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RBM14 Anticuerpo (4E1): sc-517183
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RBM14 | sc-417972-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RBM14 | sc-417972-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM14 (proteína 14 con motivo de unión a ARN) es una proteína multifuncional de unión a ARN que coordina la regulación transcripcional con el procesamiento de ARN en el núcleo. Participa en eventos asociados al espliceosoma, acoplando el empalme (splicing) del pre-ARNm con la transcripción e influyendo en programas de expresión génica vinculados al control del ciclo celular y a respuestas al estrés. RBM14 también se localiza en cuerpos nucleares y se ha implicado en la organización y dinámica de gránulos de ARN–proteína, apoyando la vigilancia del genoma y el metabolismo del ARN. La desregulación de la expresión o función de RBM14 se ha asociado con empalme aberrante y una regulación transcripcional incorrecta observada en múltiples contextos relevantes para el cáncer y en otros trastornos que implican un procesamiento alterado del ARN.
RBM14 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RBM14 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RBM14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RBM14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RBM14 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.