RBM14 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417972-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RBM14O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RBM14 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RBM14 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RBM14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RBM14 Anticorpo (4E1): sc-517183
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RBM14 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417972-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM14 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417972-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM14 (proteína 14 com motivo de ligação a RNA) é uma proteína multifuncional de ligação a RNA que coordena a regulação transcricional com o processamento de RNA no núcleo. Ela participa de eventos associados ao spliceossomo, acoplando o splicing do pré-mRNA à transcrição e influenciando programas de expressão gênica ligados ao controle do ciclo celular e às respostas ao estresse. A RBM14 também se localiza em corpos nucleares e tem sido implicada na organização e na dinâmica de grânulos de RNA–proteína, dando suporte à vigilância do genoma e ao metabolismo de RNA. A desregulação da expressão ou da função de RBM14 tem sido associada a splicing aberrante e a descontrole transcricional observados em múltiplos contextos relevantes para o câncer e em outros distúrbios que envolvem alterações no processamento de RNA.
RBM14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RBM14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RBM14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RBM14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RBM14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.